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基因測(cè)序:結(jié)核病診斷新方法
時(shí)間:2014-09-29 11:08:19 來(lái)源:轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)網(wǎng) 點(diǎn)擊:

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英國(guó)和岡比亞的研究人員已經(jīng)開(kāi)發(fā)出一種新的方法來(lái)診斷結(jié)核?。═B),這種方法利用Illumina的MiSeq系統(tǒng)對(duì)痰液中的DNA進(jìn)行直接測(cè)序,以檢測(cè)和鑒定分枝桿菌,而不再需要耗時(shí)的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。

 

這項(xiàng)研究成果于9月23日刊登在開(kāi)放獲取的《PeerJ》雜志上。它是由英國(guó)華威醫(yī)學(xué)院的微生物基因組學(xué)教授Mark Pallen和岡比亞的英國(guó)醫(yī)學(xué)研究委員會(huì)TB診斷實(shí)驗(yàn)室的主管Martin Antonio博士指導(dǎo)的。

 

Pallen教授表示,一直以來(lái),實(shí)驗(yàn)室都利用傳統(tǒng)方法來(lái)診斷結(jié)核病,這需要數(shù)周甚至數(shù)月。“宏基因組學(xué)利用最新的高通量測(cè)序技術(shù)和一些智能的生物信息學(xué),讓我們能夠在一到兩天的時(shí)間內(nèi)檢測(cè)和鑒定那些導(dǎo)致TB的細(xì)菌,同時(shí)讓我們深入了解它們的基因組序列和所屬的譜系,”他說(shuō)。

 

在這項(xiàng)研究中,Pallen和他的團(tuán)隊(duì)聯(lián)合非洲科學(xué)家一起開(kāi)發(fā)新穎的測(cè)序和分析方法。Antonio博士表示:“結(jié)核病仍然是非洲乃至全世界的一個(gè)大問(wèn)題。參與開(kāi)發(fā)這種致命疾病的新診斷方法讓人很興奮。”

 

研究人員檢測(cè)了8個(gè)痰液樣本中TB細(xì)菌的序列,能夠?qū)?個(gè)樣本的細(xì)菌分配到已知的譜系。他們還發(fā)現(xiàn),2個(gè)樣本含有非洲分枝桿菌(Mycobacterium africanum)的序列,這是結(jié)核分枝桿菌的一種,主要在西非出現(xiàn)。研究人員利用差異裂解方法對(duì)痰液樣本進(jìn)行分析,接著采用試劑盒提取DNA,并在Illumina的MiSeq平臺(tái)上開(kāi)展了測(cè)序。

 

Pallen及其同事之前也利用鳥(niǎo)槍法宏基因組來(lái)檢測(cè)當(dāng)代及過(guò)去一些材料中的病原菌。去年,他的研究小組采用宏基因組學(xué)的方法,從糞便樣本中確定大腸桿菌爆發(fā)菌株,并從215年歷史的匈牙利木乃伊中發(fā)現(xiàn)了TB基因組。在今年早些時(shí)候,他們還從意大利撒丁島上距今700年的骨骼中發(fā)現(xiàn)了羊種布魯氏菌(Brucella melitensis)的基因組,這種細(xì)菌導(dǎo)致牲畜和人類出現(xiàn)布魯氏菌病。

 

Pallen和Antonio的團(tuán)隊(duì)計(jì)劃在廣泛的樣本上檢測(cè)宏基因組學(xué)技術(shù)。他們希望宏基因組學(xué)能協(xié)助檢測(cè)由一種以上細(xì)菌引起的混合感染。不過(guò),他們也強(qiáng)調(diào),對(duì)于常規(guī)診斷,宏基因組學(xué)還有很長(zhǎng)一段路要走。

 

“我們已經(jīng)提供了原理論證,但我們還需要讓宏基因組學(xué)更加靈敏,同時(shí)改進(jìn)我們的流程。不過(guò),我們還是可以慶祝一下,因?yàn)楹昊蚪M學(xué)隨時(shí)能記錄過(guò)去和現(xiàn)在的感染,闡明微生物病原體的出現(xiàn)、進(jìn)化和擴(kuò)散,”Pallen說(shuō)。

 
參考文獻(xiàn)

Culture-independent detection and characterisation of Mycobacterium tuberculosis and M. africanum in sputum samples using shotgun metagenomics on a benchtop sequencer

文獻(xiàn)檢索:DOI :10.7717/peerj.585

Tuberculosis remains a major global health problem. Laboratory diagnostic methods that allow effective, early detection of cases are central to

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